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標記速度、均勻性和多功能性超出以往
新技術(shù)可高效標記細胞蛋白質(zhì)
美國麻省理工學院開發(fā)的一項名為“CuRVE”的新技術(shù),能在前所未有的速度、均勻性和多功能性下,高效標記完整3D組織裡數(shù)百萬個細胞中每個細胞的蛋白質(zhì),展示了其一天內(nèi)對整個嚙齒動物大腦及其他大型組織樣本進行豐富標記的能力。這項成果發(fā)表在最新《自然·生物技術(shù)》雜志上。
分析細胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)是生物學和神經(jīng)科學研究的重要內(nèi)容,因為它們反映了細胞的功能狀態(tài)或?qū)Νh(huán)境(如疾病或治療)的反應(yīng)。盡管顯微鏡和標記技術(shù)已有顯著進步,但仍缺乏一種可靠且實用的方法來追蹤整個3D組織(如小鼠大腦或人腦的大區(qū)域)中密集排列的單個細胞的蛋白質(zhì)表達。傳統(tǒng)方法通常隻能觀察載玻片上的薄組織切片,無法全面了解整個系統(tǒng)中的蛋白質(zhì)表達情況。
新方法“CuRVE”用一種稱為“eFLASH”的技術(shù)實現(xiàn)了對大而致密組織的均勻處理,解決了抗體滲入組織速度慢的問題。團隊通過復(fù)雜的計算模擬優(yōu)化了不同的設(shè)置和參數(shù),不僅能夠通過改變脫氧膽酸濃度和標記液的pH值來調(diào)節(jié)抗體結(jié)合,還利用隨機電轉(zhuǎn)運技術(shù)加速抗體在組織中的擴散。
“eFLASH”這一具有連續(xù)可調(diào)結(jié)合速度的加速分散系統(tǒng),可應(yīng)用於標記多種不同類型的組織,包括60多種不同的抗體用於標記小鼠和大鼠的整個大腦細胞、整個小鼠胚胎、其他小鼠器官(如肺和心臟),以及包括人類在內(nèi)的大型動物的腦組織塊。
這些標本均在一天內(nèi)完成標記,顯示出極高的效率。此外,不同的制備過程不需要新的優(yōu)化步驟,進一步簡化了實驗流程?!癈uRVE”技術(shù)不僅提高了標記速度和均勻性,還揭示了其他廣泛使用的標記方法所未能發(fā)現(xiàn)的新見解,為生物學和神經(jīng)科學的研究開辟了新的前景。(記者張夢然)
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